Логин:
Пароль:

Работа №1614
Название работы
Создание клеточной линии табака для эффективного синтеза и наработки фармацевтических белков на основе транзиентной экспрессии
Автор работы
Гвоздева Елена Станиславовна
Дата начала работы Дата окончания работы
2010-06-03 2012-11-30
Аннотация
Предлагаемый проект направлен на создание клеточной линии, отобранной по способности к агробактериальному заражению и по способности к максимальному уровню транзиентной экспрессии гетерологичных генов (на примере активности фермента бета-глюкуронидазы). Оптимизация условий культивирования в условиях суспензионной культуры с максимальным выходом гетерологичного белка и адаптация параметров роста клеток в мини-биореакторах послужит основой для создания высокоэффективной, дешевой, биологически безопасной клеточной системы транзиентной экспрессии целевых генов, что может быть использовано для эффективного синтеза и наработки фармацевтических белков.
Тип НИР Источник финансирования Объем финансирования Вид работы
ФЦП 1006600 Федеральное агентство по образованию Фундаментальная
Промежуточный реферат №1
Цель работы - Создание клеточной линии с максимальным уровнем транзиентной экспрессии гетерологичных генов (на примере активности фермента бета-глюкуронидазы). Полнотекстовый поиск по ключевым словам на основе платформ ScienceDirect, Springerlink, Informaworld, Wiley Interscience, NCBI Pubmed и elibrary и патентные исследования по теме НИР Персональный компьютер Intel Pentium IV, с доступом через Интернет к поисковым системам ScienceDirect, Springerlink, Informaworld, Wiley Interscience, NCBI Pubmed и elibrary 1. Проведен аналитический обзор современного состояния исследований по теме НИР. 2. Разработан оптимальный вариант направления исследований и план проведения экспериментальных исследований по получению клеточных линий табака Nicotiana tabacum L. 3. Подготовлен отчет о патентных исследованиях по ГОСТ 7.32-2001(2006), ГОСТ Р12.011-96 СРПП Патентные исследования.
Инвентарный номер отчета (ИК): 02201056270 Дата регистрации ИК: 2010-09-06
Промежуточный реферат №2
Цель работы - Создание клеточной линии с максимальным уровнем транзиентной экспрессии гетерологичных генов (на примере активности фермента бета-глюкуронидазы) Были использованы методики - получение стерильных растений in vitro; индукция каллусообразования и культивирование каллусных и суспензионных культур растений; измерение клеток каллусов под микроскопом с помощью камеры для микроскопов Moticam 2300; определение жизнеспособности и ростового индекса клеточных культур. Инструментарий, использованный при выполнении отдельных видов работ - микроскоп бинокулярный МС 20; камера для микроскопов Moticam 2300; шейкер Unimax 2010; спектрометр AvaSpec-2048-FT-2-SPU. Результаты 2-го этапа по Государственному контракту - получены активно растущие каллусные и суспензионные клеточные культуры растений табака SR1. опубликованы тезисы и сделан доклад.
Инвентарный номер отчета (ИК): 02201057384 Дата регистрации ИК: 2010-11-17
Промежуточный реферат №3
Цель работы - Создание клеточной линии растений табака с максимальным уровнем транзиентной экспрессии гетерологичных генов (на примере активности фермента ?-глюкуронидазы) Были использованы методики - культивирование каллусных и суспензионных культур растений; измерение объема клеток под микроскопом с помощью камеры Moticam 2300; определение жизнеспособности и ростового индекса клеточных культур, конструирование бинарного вектора pBI121 с генами uidA и gfp, получение препаратов ДНК и наработка плазмиды для агробактериальной трансформации. Инструментарий, использованный при выполнении отдельных видов работ - микроскоп бинокулярный МС 20; камера для микроскопов Moticam 2300; шейкер Unimax 2010; амплификатор MyCycler с многоуровневым контролем температуры, камера для горизонтального электрофореза Sub Cell 96 с заливочным столиком, трансиллюминатор ЕСХ-26МХ (Vilber Lourmat), видеосистема GelDoc-it UVP. Результаты 3-го этапа по Государственному контракту - получены активно растущие суспензионные клеточные культуры растений табака SR1, сконструирован бинарный вектор pBI121 с генами uidA и gfp, наработана плазмида для агробактериальной трансформации.
Инвентарный номер отчета (ИК): 02201160482 Дата регистрации ИК: 2011-09-02
Промежуточный реферат №4
Цель работы - Создание клеточной линии с максимальным уровнем транзиентной экспрессии гетерологичных генов (на примере активности фермента бета-глюкуронидазы). При выполнении отдельных видов работ 4-го этапа по Государственному контракту были использованы следующие методики - культивирование каллусных и суспензионных культур растений; агробактериальная трансформация клеточных культур растений табака (Nicotiana tabacum L.), гистохимическое выявление GUS-активности. Инструментарий, использованный при выполнении отдельных видов работ (этапов) по Государственному контракту - климатическая камера роста KBWF 240 Binder; автоклав автоматический Sanyo MLS-2420; ламинарный шкаф NuAire LabGuard 437-300; портативный рН-метр Hanna Instruments 8314; дистиллятор ДЭ 4; весы Sartorius СР 622; микроскоп бинокулярный МС 20; камера для микроскопов Moticam 2300; шейкер Unimax 2010; орбитальный шейкер OS-10; термостат суховоздушный с охлаждением MIR-153 Sanyo; термостат суховоздушный Sanyo; шкаф сухожаровой - сушильный шкаф с естественной конвекцией, амплификатор MyCycler с многоуровневым контролем температуры. Также был проведен дополнительный полнотекстовый поиск по ключевым словам на основе платформ ScienceDirect, Springerlink, Informaworld, Wiley Interscience, NCBI Pubmed и elibrary по теме НИР с помощью персонального компьютера Intel Pentium IV (с доступом через Интернет к поисковым системам ScienceDirect, Springerlink, Informaworld, Wiley Interscience, NCBI Pubmed и elibrary). Результаты работ 4-го этапа по Государственному контракту – получены трансформированные uidА-геном клеточные культуры табака; подготовлена статья к публикации в журнале «Вестник Томского государственного университета. Биология».
Инвентарный номер отчета (ИК): 02201162302 Дата регистрации ИК: 2011-11-21
Промежуточный реферат №5
Цель работы - Создание клеточной линии с максимальным уровнем транзиентной экспрессии гетерологичных генов (на примере активности фермента бета-глюкуронидазы). При выполнении отдельных видов работ 5-го этапа по Государственному контракту были использованы следующие методики - культивирование каллусных и суспензионных культур растений табака (Nicotiana tabacum L.), трансформированных Agrobacterium tumefaciens, содержащими маркерный ген npt II и репортерный ген uidА в плазмиде pBi121; гистохимическое выявление GUS-активности. Инструментарий, использованный при выполнении отдельных видов работ (этапов) по Государственному контракту - климатическая камера роста KBWF 240 Binder; автоклав автоматический Sanyo MLS-2420; ламинарный шкаф NuAire LabGuard 437-300; портативный рН-метр Hanna Instruments 8314; дистиллятор ДЭ 4; весы Sartorius СР 622; микроскоп бинокулярный МС 20; камера для микроскопов Moticam 2300; шейкер Unimax 2010; орбитальный шейкер OS-10; термостат суховоздушный с охлаждением MIR-153 Sanyo; термостат суховоздушный Sanyo; шкаф сухожаровой - сушильный шкаф с естественной конвекцией. Также был проведен дополнительный полнотекстовый поиск по ключевым словам на основе платформ ScienceDirect, Springerlink, Informaworld, Wiley Interscience, NCBI Pubmed и elibrary по теме НИР с помощью персонального компьютера Intel Pentium IV (с доступом через Интернет к поисковым системам ScienceDirect, Springerlink, Informaworld, Wiley Interscience, NCBI Pubmed и elibrary). Результаты работ 5-го этапа по Государственному контракту – получены 3 линии активно растущих суспензионных культур табака с высоким уровнем экспрессии репортерного гена uidА.
Инвентарный номер отчета (ИК): 02201261681 Дата регистрации ИК: 2012-09-28
Заключительный реферат
В отчете представлены результаты исследований, выполненных по 6 этапу Государственного контракта № П1168 "Создание клеточной линии табака для эффективного синтеза и наработки фармацевтических белков на основе транзиентной экспрессии" (шифр "НК-602П") от 03 июня 2010 по направлению "Физико-химическая молекулярная и клеточная биология" в рамках мероприятия 1.2.2 "Проведение научных исследований научными группами под руководством кандидатов наук.", мероприятия 1.2 "Проведение научных исследований научными группами под руководством докторов наук и кандидатов наук", направления 1 "Стимулирование закрепления молодежи в сфере науки, образования и высоких технологий" федеральной целевой программы "Научные и научно-педагогические кадры инновационной России" на 2009-2013 годы. Цель работы - Создание клеточной линии с максимальным уровнем транзиентной экспрессии гетерологичных генов (на примере активности фермента бета-глюкуронидазы). При выполнении отдельных видов работ 6-го этапа по Государственному контракту были использованы следующие методики - культивирование каллусных и суспензионных культур растений табака (Nicotiana tabacum L.), трансформированных Agrobacterium tumefaciens, содержащими маркерный ген npt II и репортерный ген uidА в плазмиде pBi121; гистохимическое выявление GUS-активности. Инструментарий, использованный при выполнении отдельных видов работ (этапов) по Государственному контракту - климатическая камера роста KBWF 240 Binder; автоклав автоматический Sanyo MLS-2420; ламинарный шкаф NuAire LabGuard 437-300; портативный рН-метр Hanna Instruments 8314; дистиллятор ДЭ 4; весы Sartorius СР 622; микроскоп бинокулярный МС 20; камера для микроскопов Moticam 2300; шейкер Unimax 2010; орбитальный шейкер OS-10; термостат суховоздушный с охлаждением MIR-153 Sanyo; термостат суховоздушный Sanyo; шкаф сухожаровой - сушильный шкаф с естественной конвекцией. Также был проведен дополнительный полнотекстовый поиск по ключевым словам на основе платформ ScienceDirect, Springerlink, Informaworld, Wiley Interscience, NCBI Pubmed и elibrary по теме НИР с помощью персонального компьютера Intel Pentium IV (с доступом через Интернет к поисковым системам ScienceDirect, Springerlink, Informaworld, Wiley Interscience, NCBI Pubmed и elibrary). Результаты работ 6-го этапа по Государственному контракту – получены 3 линии активно растущих суспензионных культур табака с высоким уровнем экспрессии репортерного гена uidА; оформлена заявка на патент «Способ получения клеточной суспензионной культуры трансгенного табака N. tabacum L., содержащего ген uidA для создания на ее основе биопродуцентов рекомбинантных белков» (регистр. № 2012135316 от 16.08.2012 г.).
Инвентарный номер отчета (ИК): 02201263073 Дата регистрации ИК: 2012-11-27
Заказчик
Федеральное агентство по образованию, ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы», Мероприятие 1.2.2. Проведение научных исследований научными группами под руководством кандидатов наук, НК-602П «Проведение поисковых научно-исследовательских работ по направлению «Физико-химическая молекулярная и клеточная биология» в рамках мероприятия 1.2.2 Программы" заявка № НК-602П/20, ГК № П1168 от 03 июня 2010
ГРНТИ УДК Инвентарный номер Госшифр Госконтракт Договор
34.31.33 ( БИОЛОГИЯ. Физиология растений. Культура тканей и органов растений. )
62.33.29 ( БИОТЕХНОЛОГИЯ. Клеточная инженерия. Культивирование растительных клеток и тканей. )
62.09 ( БИОТЕХНОЛОГИЯ. Сырье и продуценты для биотехнологического производства. )
581.4; 602.6:58; 602.3/.4; 537462 НК-602П/20 П1168
Ключевые слова
клеточные структуры, суспензионные структуры, транзиентная экспрессия, GUS-активность
Предполагаемый результат работы
Отчет
Организации соисполнители
Государственный учет результатов НИОКР в БД РНТД Минобрнауки РФ
Получить полный доступ
Основание к регистрации темы (электронный вариант)
Только для служебного пользования
   
2007 © ОНТИ НУ ТГУ
E-mail: onti@sun.lib.tsu.ru
Тел: 52-76-99